更多产品导航
详细联系方式
  • 全国统一服务热线:400 028 6680
  • 【总部】
  • 电话:028-61981289/61981396
  • 电话:028-61981578
  • 【北京办事处】
  • 电话:010-85791926/85757389
  • 手机:15001279203
  • 【重庆办事处】
  • 电话:023-68211419
  • 手机:15123122252
  • 【武汉办事处】
  • 电话:027-62577113
  • 手机:13667200670
  • 【上海总代理】
  • 电话:021-35110780
  •         021-35326252
  • 【河南总代理】
  • 手机:13949099001
  •         13523540589
  • 【北京代理商】
  • 电话:010-51298504
  • 手机:13693088226
低速离心机在中性粒细胞磁珠分选中的应用>>>技术资讯>>>首页
日期:2019-9-24低速离心机在中性粒细胞磁珠分选中的应用

试剂耗材及设备:磁力分选器,磁柱,CD15磁珠试剂盒,磁珠分选缓冲液50ml,RP1640,1ml枪及枪头,20微升枪与枪头,蜀科低速离心机,15ml离心管4支,细胞计数板。

步骤:

1.制冰,保证磁力分选器可以放入冰盒内操作,在4-8℃内进行分选; 2.配液磁珠分选缓冲液(50ml?PBS液中含2mmol/L?EDTA,0.5%BSA,PH=7.2); 3.将上步初步分选的中性粒细胞悬液用蜀科低速离心机300g离心10分钟,去上清; 4.细胞重悬于磁珠分选缓冲液中,107细胞重悬于80微升缓冲液中;(如细胞数多按倍数增加) 5.107细胞中加入20微升CD15磁珠;充分混匀放入2-8℃避光孵育15分钟; 6.用1-2ml缓冲液洗涤细胞/107细胞,再次用蜀科低速离心机300g离心10分钟,去上清; 7.重悬细胞于缓冲液中,108细胞重悬于500微升缓冲液中; 8.将磁力分选器置于冰盒中,用3ml缓冲液冲洗磁柱; 9.将含有中性粒细胞的缓冲液加入磁柱中; 10.用缓冲液冲洗磁柱,每次3ml,冲洗3次; 11.除去磁场,把磁柱放置于15ml离心管上,用5ml缓冲液加压快速冲洗磁柱; 12.离心管中收集的便是中性粒细胞; 13.最后用蜀科低速离心机300g离心去上清,重悬细胞于10ml细胞培养液中,细胞计数。

相关链接: